Elabscience Caspase6活性檢測試劑盒(分光光度法)(E-CK-A386)采用分光光度法，可用于檢測細(xì)胞、組織裂解液或其它樣本的caspase 6活性。

檢測原理：

本 caspase 6活性檢測試劑盒是基于caspase6可以催化底物Ac-VEID-pNA產(chǎn)生黃色的 pNA(p-nitroaniline)， pNA在405nm附近有強(qiáng)吸收，從而可以通過測定吸光度來檢測caspase 6的活性。

Caspase 6也稱 Mch-2，最初從人的Jurkat細(xì)胞中被發(fā)現(xiàn)。Caspase6的前體被 granzyme B剪切后可以形成活化的caspase 6二聚體，而活化的caspase 6被發(fā)現(xiàn)可以誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。Caspase 6可以剪切 PARP和keratin-18，也可以剪切細(xì)胞核核被膜上的關(guān)鍵組成蛋白Lamin A。Caspase 家族中僅caspase 6可以剪切Lamin A。

保存條件：

-20°C 可保存一年。Ac-VEID-pNA (4 mM)應(yīng)適當(dāng)分裝并避光保存，避免反復(fù)凍融。

注意事項(xiàng) ：

1. 所有待檢樣本都需檢測蛋白濃度，由于樣本裂解液中含有還原劑，不適合使用 BCA 法進(jìn)行蛋白濃度測定，推薦使用考馬斯亮藍(lán)法（Bradford法）。 

2. 建議在正式實(shí)驗(yàn)前，選擇 2~3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本進(jìn)行 預(yù)實(shí)驗(yàn)，若樣本吸光值超過標(biāo)準(zhǔn)曲線的測量范圍，則需 稀釋樣本或者調(diào)整上樣量再進(jìn)行測定。

3. 進(jìn)行caspase 6活性測定的樣本，其蛋白濃度應(yīng)在1~4 mg/mL，否則會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

4. 一次實(shí)驗(yàn)的細(xì)胞數(shù)目建議不低于1×106個(gè)，組織樣本不低于50mg，以便達(dá)到 1~4 mg/mL 的蛋白濃度。否則會影響實(shí)驗(yàn)的精準(zhǔn)度，導(dǎo)致蛋白濃度過低，反應(yīng)體系內(nèi)活性caspase 6過少而OD值偏低。

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